O método de imersão de observação microscópica envolve a introdução de um líquido especial entre a lente do aparelho e o objeto em estudo. Aumenta o brilho e expande o escopo da ampliação da imagem. Assim, o objeto pode ser ampliado significativamente e seus menores elementos podem ser examinados sem alterar o equipamento. Assim, o líquido é chamado de imersão. Pode servir como uma variedade de composições. O mais popular é o óleo de imersão. Considere seus recursos com mais detalhes.
Informações gerais
O primeiro óleo de imersão para microscopia foi o cedro. No entanto, tinha uma desvantagem significativa. Com o tempo, suas propriedades mudaram e não permitiram obter os resultados desejados. Ao ar livre, o líquido começou a condensar gradualmente (até endurecer). Assim, o índice de refração também mudou. No século 20, o óleo de imersão sintético começou a ser produzido. Este fluido não tinha a deficiência acima.
Padrões de Óleo de Imersão
Chaveos parâmetros do fluido são definidos no GOST 13739-78. De acordo com a norma, o óleo de imersão possui:
- índice de refração nd=1,515±0,001;
- transmitância na faixa espectral de 500 a 700 nm com espessura de camada de 1 mm - 95%, de 400 a 480 nm - 92%;
A temperatura ideal na qual o óleo de imersão pode ser usado é de 20 graus. Existem também padrões internacionais. De acordo com a ISO 8036/1, o índice de refração é 1,518 + 0,0005, e a transmitância na camada de 10 mm para a faixa espectral de 500 a 760 nm é de 95% e em 400 nm é de 60%.
Os parâmetros indicados correspondem a óleo de imersão não fluorescente. A norma ISO 8036-1/2 define as características do líquido para luminescência. A transmitância na faixa espectral de 500 a 700 nm em uma camada de 10 mm é de 95%, de 365 a 400 nm - 60%.
Dificuldades de discrepâncias de parâmetros
Diferenças identificáveis nos padrões acima podem resultar na deterioração do desempenho de uma determinada lente ao usar um fluido inadequado. Resultado:
- O contraste é reduzido devido à aberração esférica.
- O campo do objeto de pesquisa é colorido.
- A iluminação no plano do objeto em estudo e na área de sua formação da imagem torna-se irregular.
- A imagem fica desfocada.
Nuances
Microscópios ópticos têm um limite superior de resoluçãopouco mais de 100 vezes. Nesse nível de ampliação, a iluminação do objeto em estudo deve ser de alta qualidade. Caso contrário, a imagem resultante será tão escura que será impossível ver o objeto. O fato é que a refração e o espalhamento da luz ocorrem entre a lamela e a objetiva. O óleo de imersão contribui para sua maior captação. Como resultado, a imagem fica mais clara.
Características da refração da luz
Como obter uma imagem clara? Em diferentes meios, a refração da luz ocorre de diferentes maneiras. Por exemplo, os ângulos de refração dos raios no ar e no vidro são diferentes. No primeiro caso, o indicador é 1,0, no segundo - 1,5. Este é o principal problema.
A utilização do óleo permite reduzir o índice de refração dos raios que passam pelo objeto em estudo. O fato é que o líquido tem o mesmo parâmetro que o vidro. Como resultado, um meio homogêneo é formado entre a lâmina e a lente, e a maior parte da luz que passa pelo objeto entra no instrumento. Isso resulta em uma imagem clara.
Pontos Técnicos
Como regra, os barris das lentes de imersão são gravados com óleo. O próprio elemento é usado quando é necessária uma abertura de 1,0 ou mais. Essas lentes de "imersão" são usadas para imersão direta em um líquido. A este respeito, eles são completamente selados. Isso oferece alta proteção contra danos causados pelo óleo nas lentes.
Classificação
Óleos são usados na práticaduas viscosidades: alta (tipo B) e baixa (A). Muitas vezes, na embalagem, você pode encontrar informações sobre o índice de refração. Por exemplo, eles produzem óleo de imersão (100 ml), cujo índice de refração é 1,515. Líquidos com baixa viscosidade são aplicados no espaço aéreo e com alta viscosidade - juntamente com condensadores.
Termos de Uso
Para obter uma imagem clara do objeto em estudo, você precisa seguir recomendações bastante simples:
- Encontre o objeto em estudo no controle deslizante no centro do campo em um pequeno aumento. Para isso, é usada uma lente de baixa ampliação.
- Vire a torre.
- Introduza a lente 100x na posição de trabalho.
- Coloque uma gota de óleo no vidro deslizante, a segunda na lente.
- Ajuste a distância de trabalho com foco fino até que o assunto esteja claramente visível.
Cuidado deve ser tomado ao trabalhar. É importante evitar que o ar fique entre a lamínula e a objetiva.
Óleo de imersão "Minimizado"
Líquido é usado quando se trabalha com lentes acromáticas e apocromáticas de qualquer tipo de dispositivo, exceto luminescentes. De acordo com especialistas que usaram este óleo de imersão, ele possui várias propriedades úteis. O líquido melhora significativamente a visibilidade do objeto, minimizando o brilho, a perda de luz e as aberrações ópticas. O uso de óleo expande significativamente a gama de capacidades do equipamento.
Limpezaequipamento
Após trabalhar com óleo de imersão, é necessário colocar o aparelho em ordem. A limpeza deve ser feita antes que a lente seque. O papel limpo para lentes é usado para remover resíduos de óleo. Uma folha laminada é usada para limpar todas as superfícies de vidro. O papel da lente deve ser umedecido com uma solução de lente e qualquer óleo restante deve ser removido.
Histórico
O primeiro cientista a explicar o mecanismo de imersão foi Robert Hooke. Em 1678, foi publicado seu livro Microscopium, no qual foram dadas todas as explicações. Em 1812, a imersão foi proposta como meio de corrigir aberrações da lente. O autor da ideia foi David Buster. Por volta de 1840, foram feitas as primeiras lentes de imersão. Seu criador foi D. B. Amici. Inicialmente, os pesquisadores usaram óleos de anis como líquido de imersão. O índice de refração foi próximo ao do vidro.
