Este artigo será dedicado ao fenômeno da reação de precipitação. Aqui vamos considerar as características da formulação deste fenômeno, o fenômeno de difusão, características gerais, papel na vida humana e muito mais.
Introdução ao fenômeno
A precipitação é um fenômeno do tipo sorológico, durante o qual antígenos solúveis interagem com anticorpos e, como resultado, observa-se precipitação - um precipitado.
A característica geral da reação de precipitação é uma forma de influência coordenada de antígeno e anticorpo. Esses tipos de interações permitem determinar a presença de antígenos desconhecidos na substância de teste adicionando anticorpos e antígenos conhecidos. O processo de precipitação sem a presença de sais será pior, e o melhor ótimo está na faixa de 7,0-7,4 pH.
Constituintes de uma reação
Existem três elementos principais entre os componentes da reação de precipitação:
- Antígeno de natureza molecular. Está no estado de tipo fino, em outras palavras,solúvel. Além disso, esse antígeno é chamado de precipitogênio, que é um lisado ou extrato de tecido, etc. Um precipitogênio tem uma diferença característica de um aglutinogênio, que está no tamanho das partículas que o compõem. O aglutinogênio tem um tamanho de célula inerente e os precipitógenos são proporcionais ao tamanho da molécula. A solução de antígeno é caracterizada pela transparência.
- Um anticorpo encontrado no soro sanguíneo humano, bem como no soro diagnóstico imunológico, que contém os anticorpos estudados.
- Eletrólitos são soluções de cloreto de sódio que são isotônicas.
Produção de Precipitógeno
É impossível estabelecer uma reação de precipitação sem um precipitogênio, que é obtido pela moagem de materiais e extração de antígenos proteicos deles. A extração ocorre por fervura ou outros métodos.
Lisados, assim como extratos de tecidos e órgãos, soro sanguíneo, vários tipos de filtrados baseados em culturas de caldo microbiano, bem como extrato salino de microrganismos e substâncias autolisadas, são uma notável exemplo de precipitógenos.
Configuração em precipitação
Agora vamos considerar o método de preparação da reação de precipitação.
É realizada uma reação de precipitação em anel, que ocorre em tubos de ensaio especialmente preparados. O soro é introduzido na cavidade dos pratos, derramando-o sobre a parede com a ajuda de um bico de pipeta. Em seguida, a quantidade apropriada de precipitador é cuidadosamente colocada no topo e, em seguida, o tubo é colocado na posição vertical a partir de um horizontal. Configurar e levar em conta a reação de precipitação é uma operação muito meticulosa. O resultado é registrado após o aparecimento de um anel branco na borda entre o antígeno e o anticorpo. Se os elementos reagentes da reação correspondem entre si, então eles se ligam, mas isso se torna perceptível após um longo período de tempo de sua interação.
A reação de precipitação também é realizada em uma placa de Petri ou em um vidro lâmina, onde se transfere o gel de ágar, aplicando-o em pequena camada. Depois que endurece no gel, um pequeno número de poços é cortado nos quais serão colocados antígenos e anticorpos. Existem duas formas de realizar esta ação: o método de imunodifusão radial e imunodifusão dupla.
Informações gerais
A mecânica do trabalho de precipitação é semelhante ao dispositivo de aglutinação. Sob a influência do soro do tipo imune, o antígeno, que já entrou na reação, reduz seu grau de dispersão. Uma condição importante é a transparência tanto do soro quanto do antígeno.
Você pode melhorar o registro da reação se sobrepor antígenos a anticorpos. Como resultado, pode-se observar o aparecimento de precipitados na forma de um anel. Esse fenômeno é chamado de precipitação em anel e é realizado em tubos especiais com diâmetro de 2,5 a 3,5 mm. Um dos exemplos mais comuns de reação de precipitação é o diagnóstico de antraz.
A precipitação permite determinar o nível de toxigenicidade de uma cultura de difteria em ágar.
Durante a reação consideradaocorre precipitação de complexos antigênicos e anticorpos. A precipitação é um fenômeno imunológico que permite determinar a quantidade de anticorpos no soro sanguíneo de uma pessoa e animais doentes ou vacinados.
Consequência da titulação
É importante saber que os dados obtidos pela titulação do método acima não são quantificáveis. Para criar e analisar uma avaliação quantitativa do número de anticorpos contidos, uma técnica de reação especial foi desenvolvida por M. Heidelberger e E. Kabat, que se baseia na busca e identificação da zona de equivalência. A mistura do número de idade de antígenos com um volume constante de anti-soro leva a um aumento no precipitado inicialmente formado e, novamente, diminui devido a um aumento na capacidade de dissolver os complexos de antígeno. Ao determinar a quantidade de anticorpos nos sobrenadantes contidos em cada tubo, você pode descobrir que um certo número de pratos com anticorpos estará f altando líquido. Aqui, em comparação com outros tubos de ensaio, o maior precipitado será formado. Devido a isso e subtraindo o precipitado de proteína antigênica do valor total de proteínas, é possível obter o valor exato dos anticorpos contidos no volume do soro específico em estudo. Além disso, a quantidade de moléculas de proteína do precipitado é determinada pela quantidade de nitrogênio ou usando métodos colorimétricos.
Avaliação de valores
A estimativa dos valores de precipitação na metodologia diagnóstica deve levar em conta a possibilidade da presença no soro imune de um anticorpo que não possui a propriedade de precipitina, do que se conclui que o próprio precipitado pode não ser formado após reagir com antígenos. A lista de tais moléculas inclui anticorpos incompletos e algumas espécies do grupo de globulinas gama-A.
A reação de precipitação em condições de laboratório encontra sua aplicação em vários tipos de modificações. Por exemplo, a reação de termoprecipitação é usada para detectar antígenos bacterianos de botulismo, antraz, etc., que não sofrem desnaturação térmica. Ao contrário da precipitação em anel, este tipo de reação utiliza filtrados do material em questão em estado fervido.
A análise da reação de precipitação em uma mistura complexa não permite caracterizar as propriedades dos elementos individuais da mistura. Nesses casos, uma pessoa recorre ao método de precipitação em ágar e também usa imunoeletroférese.
Precipitação difusa
Nesta área de pesquisa, existe o conceito de reação de precipitação difusa (RPD). Baseia-se na capacidade de difundir no gel de anticorpos e antígenos solúveis. A difusão é a capacidade de uma molécula de uma determinada substância penetrar nas moléculas de outra, o que é causado pelo movimento térmico.
Gel é um sistema do tipo disperso em que a fase líquida é distribuída uniformemente na fase sólida. Na maioria das vezes, o gel de ágar é usado para tal reação.
Depois de fornecer os parâmetros, emcondições sob as quais as moléculas podem se difundir umas em relação às outras, seu encontro será acompanhado pela formação de um complexo antígeno + anticorpo. Tal neoplasia é capaz de se difundir, estando no próprio gel, e irá precipitar, tomando a forma de uma tira que pode ser detectada a olho nu. Se o antígeno e o anticorpo forem homólogos, nenhuma banda se formará.
Criar as condições sob as quais a difusão ocorrerá enquanto na camada de ágar envolve derramar os componentes, mas o número total de poços e sua posição relativa são determinados por o tipo de tarefa que é necessário decidir. O RPD dá a uma pessoa a capacidade de detectar e identificar vírus isolados desconhecidos testando usando soros de anticorpos conhecidos.
Aplicativo
A precipitação é amplamente utilizada não apenas no diagnóstico de doenças, mas também encontra sua aplicação no exame médico forense. É difícil imaginar uma análise em que seja possível determinar a espécie de sangue, parte de um órgão ou tecido encontrado em uma arma de crime que não utilize a reação de precipitação. Durante este processo, são utilizados soros precipitantes, que são obtidos através da imunização de vários animais e aves. É importante que o nível de título sérico não seja inferior a 1:10.000, e também deve ter especificidade suficiente. A partir da mancha detectada de sangue ou de sua crosta, é feito um extrato para fins físicos. solução, que será ainda exposta asoro precipitante. De acordo com essa reação, é possível estabelecer os tipos de proteínas de tecidos e órgãos tanto de humanos quanto de animais. A obtenção de extratos turvos obriga a recorrer à precipitação em ágar.
Conclusões
Analisando as informações lidas, podemos concluir que as reações de precipitação são extremamente importantes para uma pessoa, pois permitem diagnosticar vários antígenos por meio de anticorpos, esse fenômeno também é muito utilizado no exame médico forense e permite identificar o tipo de sangue, tecido ou órgão em relação a um determinado sujeito. Existem vários tipos e métodos de precipitação, que são utilizados de acordo com as necessidades emergentes do problema a ser resolvido.
