A medicina moderna possui métodos diagnósticos específicos que permitem estabelecer a etiologia das doenças em humanos com base na definição do patógeno, substâncias geneticamente alienígenas que estimulam a resposta imune, ácidos nucléicos, além de alterações alérgicas e imunológicas que ocorrem devido às suas ações. Hoje, o RIA é amplamente utilizado em imunologia e virologia, ou seja, radioimunoensaio, os objetivos de configuração, componentes, curso, cuja contabilidade consideraremos neste artigo. Este ensaio é capaz de detectar antígenos como resultado de sua interação com anticorpos.
Definição
RIA é um método de diagnóstico de substâncias biologicamente ativas em líquidos, que se baseia na reação de antígenos com anticorpos ao utilizar substâncias análogas marcadas com radionuclídeos que possuem sistemas de ligação especiais. Após sua interaçãoforma-se um complexo imune, que é separado e sua radioatividade é estudada. Sabe-se que o radioimunoensaio é realizado com kits de reagentes padrão.
Cada reagente é capaz de determinar a concentração de uma substância específica. O fluido biológico retirado de uma pessoa é misturado com um reagente, após o período de incubação, as substâncias radioativas livres e ligadas são separadas, então a radiometria é realizada e os resultados são calculados. Um isótopo de iodo é usado para rotular substâncias. É marcado e adicionado em certa quantidade.
Aplicativo
A análise radioimune tem ampla aplicação em medicina e microbiologia. É usado para diagnosticar doenças cardíacas e vasculares, doenças do sistema endócrino e outros sistemas do corpo. Os RIAs também são frequentemente usados para identificar a causa da infertilidade, a patologia do desenvolvimento fetal. Na oncologia, essa análise é realizada com o objetivo de determinar os marcadores de neoplasias para poder monitorar a eficácia do tratamento. Em imunologia, o RIA é usado para estudar a presença de imunoglobulinas, enzimas, proteínas e assim por diante no sangue. Hoje, esta análise permite detectar a concentração de vários hormônios até um milionésimo de um grama. Assim, a análise de sangue radioimune é amplamente utilizada em cardiologia, oncologia, endocrinologia, ginecologia e virologia.
Métodos RIA
É costume distinguir entre vários métodos de análise, dependendo da naturezareações:
- O método não competitivo é caracterizado por componentes de reação como antígenos padrão e detectáveis, solução tampão, anticorpos marcados com isótopos, certos anticorpos que se ligam ao sorvente. Um antígeno é adicionado aos anticorpos a serem testados. Após a incubação, aparecem complexos antígeno-anticorpo, o sorvente é lavado, são adicionados anticorpos marcados, que se ligam ao antígeno no complexo. A radioatividade depende da concentração do antígeno que está sendo testado.
- O radioimunoensaio competitivo é impulsionado pela competição do antígeno. Aqui existem componentes da reação como controle e antígenos determinados, uma solução tampão, certos anticorpos que se ligam ao sorvente, bem como um antígeno marcado com isótopo. O diagnóstico começa com a introdução do antígeno que está sendo examinado. Um complexo antígeno-anticorpo é formado no sorvente. Em seguida, o sorvente é lavado e o antígeno marcado é injetado. Ao fazê-lo, liga-se ao anticorpo. Com a ajuda de contadores, a reação e a quantidade de radioatividade são medidas. Será em proporção inversa à quantidade de antígeno na amostra.
- O método indireto é o mais comum. Neste caso, o radioimunoensaio do componente da reação tem como soro controle e teste, antígenos ou anticorpos que estão ligados ao sorvente, anticorpos marcados com isótopos, soluções tampão. Anticorpos ou antígenos diagnosticados reagem com antígenos ou anticorpos que estão ligados ao sorvente. Em seguida, o incubado é removido, anticorpos marcados são injetados, que se ligam acomplexos antígeno-anticorpo.
Metodologia de Análise
Assim, o radioimunoensaio é realizado com reagentes especiais. Os conjuntos são padrão, portanto, quaisquer erros ou violações não são permitidos. Os resultados do diagnóstico são confiáveis. A análise é realizada pela manhã, para isso eles retiram sangue venoso de uma pessoa. No laboratório, o soro é separado do sangue, que será utilizado para RIA. Este soro é misturado com reagentes. A mistura resultante é incubada a uma determinada temperatura em um termostato.
Isótopos livres e ligados são separados na mistura resultante. Depois disso, o material recebido é examinado e os resultados são calculados. O mecanismo de radioimunoensaio tem várias opções. A técnica descrita acima é um RIA em fase líquida, uma vez que todos os componentes estão em estado líquido. Há RIA e fase sólida, onde os anticorpos são colocados em um carreador que não se dissolve em líquido.
Disponibilidade de diagnóstico
O uso deste método de diagnóstico na medicina está se tornando cada vez mais popular a cada ano. Recentemente, o radioimunoensaio tornou-se um método diagnóstico padrão que pode ser prescrito por um médico ao fazer um diagnóstico final. Por muito tempo esse tipo de análise era realizado apenas em laboratórios, hoje se tornou um método de pesquisa comum. Mas o RIA requer o uso de equipamentos caros (contadores gama) e os kits de reagentes têm uma vida útil curta. Tudo isso é o principal inconveniente de tal análise, que determina suacusto caro.
Além disso, a RIA começou recentemente a suplantar métodos de pesquisa mais modernos que não requerem interação com isótopos. Estes incluem imunoensaio enzimático. Assim, RIA é desejável em muitas clínicas. Há muito tempo é utilizada em grandes cidades e centros de diagnóstico, mas em hospitais comuns de pequenas cidades essa análise praticamente não é utilizada devido ao seu alto custo.
Dignidade da RIA
Radioimunoensaio tem muitas vantagens. É bastante específico e possui alta sensibilidade, o que permite determinar a presença de substâncias biologicamente ativas em quantidades incrivelmente pequenas. Esta análise é realizada de forma muito simples, uma pessoa só precisa doar sangue venoso. Os resultados dos testes são 100% precisos e prontos no dia seguinte. O RIA também pode ser facilmente automatizado. Assim, esta análise permite identificar proteínas que são produtos residuais de bactérias infecciosas, o que indica a presença de infecção no organismo.
Diagnóstico em Virologia
A RIA mais promissora é para virologia, pois permite identificar rapidamente patógenos virais. Isso se deve ao fato de que nos últimos anos vem crescendo a incidência de diversas infecções, que estão se disseminando em alta velocidade, causando mortalidade entre as pessoas. Isto é especialmente verdade para os países que não têm uma altadesenvolvimento social e econômico (os países do Extremo Oriente), o radioimunoensaio é simplesmente indispensável aqui. A microbiologia também usa esse método de diagnóstico para detectar doenças infecciosas causadas por bactérias patogênicas. Por exemplo, o RIA é amplamente utilizado para detectar febre tifóide. Nos primeiros dias da doença, antes da nomeação do tratamento, é necessário realizar um estudo de fezes e vômitos. No entanto, os resultados do diagnóstico serão obtidos após um longo tempo. Aqui o RIA vem em socorro, a análise permite identificar o agente causador da doença em pouco tempo. Uma pessoa doa sangue, no dia seguinte os resultados do estudo estão prontos. Essa análise ajuda a fazer um diagnóstico preciso.
Resultados
Radioimunoensaio é atualmente um dos métodos diagnósticos mais sensíveis. É usado para analisar qualquer substância contra a qual os anticorpos podem ser obtidos. Este método permite fazer muitas amostras no menor volume do líquido investigado, bem como registrar os resultados no menor tempo possível, pois pode ser totalmente automatizado. Esta análise foi desenvolvida na década de 1950 por Solomon Burson. Trinta anos depois, tornou-se generalizada. Até o momento, não há alternativa cem por cento ao RIA, pois a análise tem alta sensibilidade. O RIA é usado em vários ramos da medicina, bem como em microbiologia e virologia.
Finalmente
O uso do método em virologia é muito relevante hoje, pois dáa capacidade de investigar a propagação de infecções, fazer um diagnóstico preciso e prescrever um tratamento específico. Esse problema é especialmente relevante para países que apresentam baixo nível de desenvolvimento econômico e social. Além disso, esta análise permite detectar a quantidade de hormônios e enzimas no corpo humano. Para obter resultados confiáveis, o pesquisador precisa apenas doar sangue para análise. A medicina não para, junto com o radioimunoensaio, surgem novos métodos de pesquisa, mas a RIA continua sendo uma das líderes em diagnóstico médico.
