Selenite caldo é um meio de enriquecimento com propriedades seletivas, destinado a isolar bactérias patogênicas do gênero Salmonella (lat. Salmonella). É muito eficaz se for necessário detectar esse patógeno específico entre outros representantes da microflora intestinal. O meio é usado tanto para diagnóstico clínico quanto para fins sanitários em testes de alimentos.
Características gerais
O caldo de selenita é preparado a partir de um pó, que é uma mistura homogeneizada de vários componentes da composição. A cor do material seco pode ser amarelo claro ou creme, dependendo do tipo de meio. O pó tem propriedades de fluxo livre.
O caldo de selenito pronto é um meio líquido transparente de cor amarelo claro. Esta massa é despejada em recipientes onde é realizada a semeadura para posterior incubação.
Existem três tipos principais de caldo de selenita:
- meio puro - adequado para o isolamento de Salmonella de material clínico e sanitário;
- com adição de manitol (caldo de dois componentes) - projetado para trabalhar apenas com material clínico;
- meio de cisteína-selenito - pode ser usado para isolar Salmonella de biomaterial de paciente patológico (fezes, urina, etc.).
Esses tipos são ligeiramente diferentes em composição e recursos de ação.
A principal tarefa do caldo de selenita é promover o acúmulo de salmonela, inibindo o crescimento da microflora acompanhante. Isso torna possível não apenas detectar o patógeno no material, mas também transferi-lo posteriormente para o ágar. O meio foi desenvolvido por Leifler, que primeiro descobriu o efeito seletivo do selenito contra Salmonella.
Composição
Caldo Selenita contém:
- caseína hidrolisada;
- lactose;
- fosfato de sódio;
- hidroselenito de sódio.
O meio selenito-cisteína, além desses componentes, contém L-cisteína e hidrogenofosfato de sódio. A composição do caldo de manitol difere em que, em vez de hidrolisado de caseína, inclui digestão péptica de tecido animal. Não há lactose em tal ambiente, mas há manitol. Este último atua como substrato fermentável e fornece as propriedades tamponantes do caldo.
Todos os componentes do pó, exceto hidroselenito de sódio, são condicionalmente chamados de parte A, e a substância seletiva é chamada de parte B.
Princípio de funcionamento e propriedades do ambiente
Caldo Selenita funciona como meio de armazenamentocom ação seletiva. O efeito seletivo é proporcionado devido à toxicidade do selenito, que inibe o crescimento da maioria dos microrganismos. Ao mesmo tempo, bactérias do gênero Salmonella são capazes de restaurar esse composto, eliminando assim o efeito tóxico em suas próprias células. No entanto, como resultado da reação, um álcali é formado, o que reduz o efeito prejudicial do selenito no crescimento da microflora associada e, portanto, torna-se necessário estabilizar o pH. Essa função é desempenhada por bactérias que fermentam a lactose com a formação de ácido. O tamponamento do meio é fornecido pelo fosfato.
Em caldo de dois componentes, o pH é estabilizado pelo manitol. O meio de cisteína melhora o efeito seletivo contra Salmonella. Tal caldo é eficaz para controlar o fundo infeccioso em pacientes com estágio não agudo da doença ou convalescentes.
A manifestação das características de crescimento das cepas de referência no meio pode ser observada após 12-24 horas do início da incubação. Neste caso, a Salmonella forma colônias incolores.
Recursos de Culinária
A preparação do meio é realizada em duas etapas. Primeiro, é feita uma solução com um componente seletivo na proporção de 4 gramas de selenito de sódio por litro de água destilada. Em seguida, adicione 19 gramas do pó principal (parte A). A solução é bem misturada e aquecida até que as partículas estejam completamente dissolvidas, após o que é despejada em tubos de ensaio estéreis.
Ao cozinhar, é importante seguirregime de temperatura, uma vez que o meio é instável ao superaquecimento. A esterilização do caldo pode ser realizada apenas em banho-maria ou usar um jato de vapor. A autoclavagem do meio é estritamente proibida.
