A pesquisa sobre bactérias requer um trabalho meticuloso com vários equipamentos e instrumentos. Para que os microrganismos se multipliquem o mais rápido possível em condições de laboratório e possam manter a atividade vital normal, são utilizados meios nutrientes especiais. Sua composição e condições biofísicas são adequadas para o crescimento ativo de uma cultura bacteriana.
Meio nutritivo. Microbiologia e outras aplicações
As colônias bacterianas são cultivadas em laboratório em placas de Petri preenchidas com conteúdo gelatinoso ou semilíquido. Estes são meios nutrientes, cuja composição e propriedades são o mais próximo possível das naturais para o crescimento de culturas de alta qualidade.
Tais ambientes são usados em pesquisas microbiológicas e em laboratórios de diagnóstico médico. Estes últimos trabalham mais frequentemente com esfregaços de bactérias patogênicas ou oportunistas, cuja posição sistemática é determinada diretamente na instituição.
Natural e sintéticoQuarta-feira
A regra básica do trabalho com bactérias é a seleção correta do meio nutriente. Deve atender a vários critérios, incluindo o conteúdo de micro e macro elementos, enzimas, um valor constante de acidez, pressão osmótica e até mesmo a porcentagem de oxigênio no ar.
Os meios nutritivos são classificados em dois grandes grupos:
- Ambientes naturais. Tais misturas são preparadas a partir de ingredientes naturais. Isso pode ser água de rio, partes de plantas, estrume, vegetais, tecidos de plantas e animais, leveduras, etc. Tais ambientes são caracterizados por um alto teor de produtos químicos naturais, cuja variedade promove o crescimento da cultura bacteriana. Apesar dessas vantagens óbvias, os ambientes naturais não permitem pesquisas especializadas com cepas bacterianas específicas.
- Mídia sintética. Eles diferem em que sua composição química é conhecida em proporções exatas de todos os constituintes. Tais meios são preparados para uma cultura específica de bactérias, cujo metabolismo é conhecido antecipadamente pelo pesquisador. Na verdade, por esta razão, é possível preparar tal ambiente sintético para o desenvolvimento de microrganismos. Eles são usados para analisar a atividade vital das bactérias. Por exemplo, você pode descobrir quais substâncias eles liberam no meio ambiente e quanto. Os microrganismos também crescerão em meios naturais, mas é impossível rastrear quaisquer mudanças quantitativas na composição devido ao desconhecimento das proporções iniciais das substâncias.
Diferencial-ambientes de diagnóstico
No trabalho com bactérias, não apenas meios nutrientes comuns podem ser usados. A microbiologia é uma ciência vasta e, portanto, ao realizar um estudo, às vezes é necessário fazer uma seleção de microrganismos por algum motivo. O uso de meios de diagnóstico diferencial em laboratório permite selecionar as colônias bacterianas desejadas em uma placa de Petri de acordo com o sinal bioquímico de sua atividade vital.
A composição de tais ambientes sempre inclui os seguintes componentes:
1. Nutrientes para o crescimento celular.
2. Substrato analisado (substância).
3. Um indicador que dará uma cor característica quando uma determinada reação ocorrer.
Um exemplo é o meio nutriente de diagnóstico diferencial "Endo". É usado para selecionar colônias de bactérias que podem quebrar a lactose. Inicialmente, este meio tem uma cor rosada. Se uma colônia de microrganismos não é capaz de decompor a lactose, ela assume a cor branca usual. Se as bactérias podem quebrar esse substrato, elas se transformam em uma cor vermelha brilhante característica.
Quartas eletivas
Os laboratórios de diagnóstico geralmente trabalham com zaragatoas que contêm muitos tipos diferentes de bactérias. Obviamente, para um trabalho de qualidade, é necessário selecionar de alguma forma as colônias que precisamos de dezenas de forasteiros. É aqui que um meio de crescimento bacteriano pode ajudar, que é idealmente formulado para suportar apenas um tipo de microrganismo.
Por exemplo,tal ambiente eletivo é adequado apenas para a reprodução de Escherichia coli. Então, ao semear muitas bactérias em uma placa de Petri, veremos apenas colônias da mesma Escherichia coli e nada mais. Antes de iniciar o trabalho, é necessário conhecer bem o metabolismo da bactéria estudada para selecioná-la com sucesso a partir de uma mistura de outras espécies.
Meios de cultura sólidos, semi-sólidos e líquidos
As bactérias podem ser cultivadas não apenas em substratos sólidos. Os meios nutrientes diferem uns dos outros em seu estado de agregação, que depende da composição durante a fabricação. Inicialmente, todos têm consistência líquida, e quando se adiciona gelatina ou ágar em certa porcentagem, a mistura solidifica.
Os meios de cultura líquidos são normalmente encontrados em tubos de ensaio. Se for necessário cultivar bactérias nessas condições, adicione uma solução com uma amostra de cultura e aguarde 2-3 dias. O resultado pode variar: forma-se um precipitado, aparece um filme, flutuam pequenos flocos ou forma-se uma solução turva.
O meio de cultura denso é frequentemente usado em pesquisas microbiológicas para estudar as propriedades das colônias bacterianas. Tais meios são sempre transparentes ou translúcidos para que seja possível determinar corretamente a cor e a forma da cultura de microrganismos.
Preparação de mídia
Substratos como as misturas de carne-peptona à base de caldo, gelatina ou ágar são muito fáceis de preparar. Se você precisar transformar um substrato sólido ou semilíquido, em um líquidoadicionar 2-3% ou 0, 2-0, 3% de gelatina ou ágar, respectivamente. Eles desempenham um papel importante no endurecimento da mistura, mas não são uma fonte de nutrientes. Assim, obtêm-se meios nutrientes adequados ao crescimento de uma cultura bacteriana.
